细胞外囊泡（extracellular vesicles开yun体育网，EV）是一种险些总共种类细胞均可分泌的纳米至微米尺寸脂质双层膜结构，它们由脂质双层膜包围，大小无间在纳米至微米级别。细胞外囊泡（EV）不错由各式细胞类型开释，包括但不限于免疫细胞、癌细胞、干细胞，以及来自组织和器官的细胞。细胞外囊泡（EV）所佩戴的卵白质符号物已在恶性肿瘤、本身免疫性疾病、代谢性疾病及神经退行性疾病中进行了等闲的应用探索，并在临床应用中展现出特有的后劲。

细胞外囊泡（EV）卵白质符号物在本身免疫性疾病如系统性红斑狼疮和Sjögren空洞征中融会出会诊和监测的上风。系统性红斑狼疮患者中EV抒发高水平的免疫球卵白和补体因素，有助于评估疾病的举止性和严重性。 在恶性肿瘤中，细胞外囊泡（EV）卵白质符号物有助于识别不同类型癌细胞及癌症证据。举例，在胰腺癌、前线腺癌和肝癌等肿瘤中，特定的EV卵白质如PD1、PSA、PTEN以及EpCAM等被发现与疾病举止讨论。 在代谢性疾病中，EV卵白质符号物能反馈肝脏和肾脏的代谢功能景色，可协助非乙醇性脂肪肝病和糖尿病等疾病的会诊。止境是在非乙醇性脂肪肝疾病中，EV特定卵白符号物（如CD14和CD16）可用于评估肝纤维化的严重性。 在神经退行性疾病中，EV卵白质符号物在疾病早期会诊和监测中也融会出垂死的后劲。如阿尔茨海默病患者的EV佩戴β淀粉样卵白和Tau卵白等与精神病理证据密切讨论的卵白质 。 张开剩余70%

现在，针对卵白质的细胞外囊泡（EV）常见符号物有多种时期可供聘请，可凭据符号物的特征聘请相宜的检测时期：

1、卵白质免疫思路（western blotting）

一般由凝胶电泳、样品的思路和免疫学检测3个部分构成，是凭据抗原抗体特异性结合检测样本中某种卵白的要领，与ELISA不同的方位在于WB是一种半定量的检测要领。WB是最常用的细胞外囊泡（EV）卵白定性表征时期。可是，卵白质免疫思路所需EV样品量大、操作繁琐、推行历程长，甘休了其在临床进修限制的应用 。

2、酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）

是一种常用于细胞外囊泡（EV）卵白定性或定量分析的免疫检测要领，具有操作方便、经济实用、易于模范化、特异性强等上风。由于细胞外囊泡（EV）的异质性，所用拿获抗体莫得调处模范，使用不同拿获抗体的酶联免疫吸附测定法检测研究 EV卵白效果的可比性较差 。

3、流式细胞术（Flow Cytometry，简称FCM）

通过荧光象征遐想抗体或荧光探针结合细胞外囊泡（EV）名义特定卵白质，经流式细胞仪检测。而得回定性或相对定量信息，微珠拿获细胞外囊泡（EV）是一种较常用的流式检测政策。此外，纳米流式细胞术自便了传统流式分析仪检测粒径的极限，将检测聪慧度提升至40 nm，不仅具备单EV分析才气，还可竣事EV名义卵白符号物的多参数检测，有望成为临床推行室单个细胞外囊泡（EV）分析的相宜检测平台。

4、质谱时期（Mass Spectrometry）

由于远离率高、通量高、不受抗体甘休等秉性已安宁成为 EV卵白质组学的主要参谋技巧。其中，非靶向卵白质组时期用于细胞外囊泡（EV）卵白质全面分析和新式卵白符号物的发现 ；靶向卵白质组时期主要用于多个EV卵白符号物同期定量检测，检测通量高于流式细胞术。但质谱时期样品管束复杂，耗时长，需要专科时期东谈主员进行数据分析，效果存在一定的差错和不笃定性，因此需要结合其他时期进行考证 。

5、液滴微流控时期（Droplet microfluidic）

是基于油-水两相不相容的旨趣，用油相将勾搭的水相背应体系分割成翻脸的液滴反应单位，被等闲应用于单分子或单颗粒数字化检测 。比年来，液滴微流控时期为特异膜卵白抒发呈阳性EV检测提供了新的单囊泡分析平台。该时期欺诈微米级的液滴包裹纳米级的EV进行分析，将不受细胞外囊泡（EV）粒径不均一的影响，可竣事EV粒径全掩盖检测，何况已飘摇为单囊泡自动化检测栽培，正处于注册前性能测试阶段，有望为临床样本的EV快速检测提供时期平台 。

6、生物传感时期 （biosensing）

是一种大略通过酶、抗体、核酸等合适的生物识别元件，使其与遐想靶分子发生特异性识别，触发一系列的生物反应，进而将其浓度信号飘摇为可不雅测输出信号的定量检测要领，可对EV佩戴的低品貌特异卵白符号物进行高聪慧检测，有望成为疾病早期会诊的器具 。

发布于：江苏省